凝膠滲透色譜分析法或尺寸排除色譜法(GPC/SEC)是高分子、大分子和蛋白質(zhì)常用的主要分析手段,其中最主要的原因是它能對分子量和分子量分布數(shù)據(jù)進(jìn)行定量表征。人們通常將上述分析方法分為兩步。第一步:利用含有適當(dāng)特性微孔填充材料的色譜柱對溶解樣品按照分子大小/體積進(jìn)行分離;第二步:利用適當(dāng)?shù)臋z測儀器對被分離的樣品進(jìn)行分析。
目前市面上有很多可用于GPC/SEC的檢測儀。由于分析具有兩階段的特性,因此在選擇合適的系統(tǒng)時(shí)有很多問題需要考慮。對檢測器的選擇進(jìn)行優(yōu)化是一種既直接又高效的方法,具有較多優(yōu)勢,比如可以僅通過一次實(shí)驗(yàn)就獲得能確定分子量、流體力學(xué)尺寸和分子結(jié)構(gòu)的表征。
LALS檢測儀以非常接近入射光線的角度進(jìn)行測量,從而無需另行外推計(jì)算。MALS檢測儀則進(jìn)行多個(gè)角度的測量,并利用測量結(jié)果外推得到0o時(shí)的散射光強(qiáng)度。
動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)(DLS)進(jìn)一步豐富了光散射檢測儀的選擇范圍,它是一種廣泛應(yīng)用的測定納米級(jí)粒徑范圍的粒度測量手段,對某些GPC/SEC用戶非常有效。該技術(shù)的主要應(yīng)用領(lǐng)域是蛋白質(zhì)分析,它可以對流體力學(xué)分子半徑進(jìn)行精確測量。DLS檢測儀同時(shí)還能進(jìn)行靜態(tài)光散射測量,由此開啟了進(jìn)行分子量測量的可能。